Eventos ULBRA, 4° ENCONTRO ULBRA DE BOLSISTAS CNPQ E FAPERGS

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DETECÇÃO DOS SOROTIPOS ENTERITIDIS E HEIDELBERG DE SALMONELLA POR MÉTODO DE AMPLIFICAÇÃO ISOTÉRMICA DE DNA
Lucas Michel Wolf, Jéssica Waldman, Margarida Neves Souza, Jonas Wolf, Nilo Ikuta, Vagner Ricardo Lunge

Prédio: Prédio 14
Sala: 317
Data: 20-06-2018 14:15 – 14:30
Última alteração: 26-06-2018

Resumo


Salmonella é uma bactéria causadora de doenças humanas, normalmente devido à ingestão de alimentos de origem animal. Existem mais de 2.600 sorotipos de Salmonella, mas alguns apresentam maior disseminação nos animais, elevada patogenicidade e, portanto, são responsáveis pela maioria dos surtos de infecção alimentar na população. Enteritidis é o sorotipo mais frequente em surtos de alimentos contaminados de origem animal na população humana, enquanto Heidelberg é o principal sorotipo encontrado nas carnes de frango. A detecção de Salmonella, com identificação de sorotipos, requer uma série de etapas laboratoriais de isolamento bacteriano, caracterização bioquímica e testes sorológicos. Métodos de análise de DNA são alternativas para a detecção direta de Salmonella e sorotipos, com destaque para a amplificação isotérmica de DNA pela técnica de LAMP (loop mediated isothermal amplification). Este estudo objetivou estabelecer a detecção de Salmonella dos sorotipos Enteritidis e Heidelberg pela técnica de LAMP. A metodologia consistiu no desenho e aquisição de primers, seguida da implementação dos métodos de LAMP no laboratório. Após foi realizada a análise comparativa dos métodos com testes sorológico e molecular (PCR em tempo real) na avaliação de 40 isolados de nove sorotipos importantes (sendo 14 (35%) de Enteritidis e 12 (30%) de Heidelberg) obtidos do LACEN-RS. Os resultados demonstraram que os 14 isolados de Enteritidis e os 12 de Heidelberg foram detectados somente pelos testes de PCR e LAMP específicos para cada sorotipo. A análise comparativa demonstrou total concordância entre PCR e LAMP, indicando excelente desempenho analítico dos métodos de LAMP.


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